Морфологическое исследование состава периферической крови

Клинический анализ крови означает подсчет количества клеток в образце венозной крови. Капиллярная кровь не является рекомендуемой средой исследования для подсчета клеток, однако исследование гемограммы часто выполняют из образца капиллярной крови в отделениях интенсивной терапии.

Определение лейкоцитарной формулы, исследование среднего размера эритроцитов, тромбоцитов, определение количества предшественников эритроцитов (ретикулоцитов) и степени их зрелости, оценка скорости оседания эритроцитов и т.д., все это входит в понятие «клинический анализ крови».

Клинический анализ крови выполняется как первое скрининговое исследование при обращении и жалобах пациента на недомогание. Может быть выполнен сокращенный клинический анализ крови, так называемая «тройка» – подсчет количества эритроцитов, лейкоцитов и определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ). Сокращенный клинический анализ крови малоинформативен, т.к. может охарактеризовать только выраженные патологические процессы.

Более целесообразно из того же объема образца крови выполнить развернутую гемограмму: подсчет количества эритроцитов с оценкой их среднего размера (MCV), подсчет общего количества лейкоцитов и оценку лейкоцитарной формулы (подсчет нейтрофилов, базофилов, эозинофилов, моноцитов, лимфоцитов), подсчет количества тромбоцитов и оценку среднего размера тромбоцита (MPV), ретикулоцитов и их среднего размера (MRV), степени зрелости ретикулоцитов (IRF).

Многочисленные характеристики клеток в настоящее время могут быть получены в автоматическом режиме в течение 3-5 минут после взятия крови. На основании развернутого исследования гемограммы может быть сделано не только заключение о наличии воспалительной реакции, анемии, но и характере других патологических процессов, возможной перенесенной или продолжающейся кровопотере, дефиците не только железа, но и витамина В12, фолиевой кислоты.

Метод исследования

Метод исследования зависит от требуемых параметров гемограммы.

В ручном режиме, из образца крови (3–5 мл) часть отбирается в капилляр для определения СОЭ, часть образца крови используется для определения гемоглобина, капля крови – для приготовления мазка и дальнейшего подсчета лейкоцитарной формулы. Отдельное количество крови требуется для приготовления мазка и подсчета тромбоцитов, а также часть образца крови необходима для исследования количества эритроцитов и отдельно – ретикулоцитов. В ручном режиме, при необходимости окраски и визуальной оценки мазка, результат развернутой гемограммы пациента в многокоечном стационаре, может быть получен в конце рабочего дня или позднее.

В условиях автоматизированного подсчета клеток и оценки различных популяций требуется от 150 до 300 мкл крови и 100 мкл для определения СОЭ. Исследование в автоматическом режиме основано на импедансном методе Культера (1956), в основе которого лежит принцип замыкания электрической цепи каждой клеткой, последовательно проходящей через апертуру пробоотборника. В последующем метод автоматизированного подсчета получил ряд усовершенствований, в современных анализаторах каждая клетка оценивается по нескольким параметрам: проводимости, светорассеиванию, размеру, наличию на поверхности CD-маркеров, соответственно, принадлежности к различным популяциям. Количество параметров определяется моделью прибора.

Исследование в автоматическом режиме позволяет выявить патологические образцы, которые должны быть пересмотрены визуально специалистом лабораторной диагностики. Визуальный контроль гемограммы предполагает приготовления мазка крови, слайда, что может быть выполнено из капли крови уже взятого образца как в ручном, так и автоматическом режиме. Автоматизированное приготовление мазка крови предпочтительно, т.к. происходит равномерное распределение капли крови и стандартизированное окрашивание. Визуальная микроскопия мазка проводится в пяти полях зрения.

image
image
image
image
image

Процедура взятия мазка на флору

Тщательность забора материала у женщин играет особую роль, поскольку в случае несоблюдения алгоритма результат исследования мазкого содержимого может оказаться ложным. В случае некоторых заболеваний, например, хламидиоза, возбудители инфекции локализуются в цервикальном канале и отсутствуют в самом влагалище.

Для проведения процедуры используются два предметных стекла, предварительно обработанных эфиром для обезжиривания и ликвидации лишних налетов. На стеклах специальным карандашом наносится маркировка уретры, шейки матки, влагалища (U, C, V соответственно). Как было сказано ранее, взятие мазка предшествует некоторым видам диагностики: мануальному осмотру, кольпоскопии, лечебным манипуляциям во влагалищной зоне и так далее.

Первоначально берется мазкий материал из уретры. Ее массируют пальцем, в результате чего возможно осуществить забор содержимого. Первые выделения удаляются ватным шариком, последующие забираются для исследования методом легкого поскабливания ложечкой Фолькмана — специализированным шпателем, обязательно стерильным. Содержимое, полученное в результате поскабливания, наносится на стекла с соответствующей маркировкой. Далее вводится зеркало, обнажается шейка матки, протирается ватным шариком. Новым шпателем собирают содержимое из цервикального канала (также методом поскабливания). В окончании процедуры производится забор содержимого заднего свода влагалища. Взятые мазки также наносятся на предметные стекла в соответствии с маркировками. Перед отправкой в лабораторию для микроскопии мазки высушиваются на открытом воздухе.

Важно соблюдать стерильность на каждом этапе взятия материала. Обязательно использование именно отдельных шпателей. Перчаткой мануально осуществить забор материала нельзя. Процедура проходит безболезненно и практически неощутимо для пациентки.

Условия взятия и хранения образца

Клинический анализ крови выполняется из венозной крови, стабилизированной калиевой солью ЭДТА, если не указано иначе в инструкции к анализатору. Взятие крови выполняется натощак. Образец крови должен быть немедленно после взятия перемешан 9 раз осторожным переворачиванием, следует избегать образования пены и резкого встряхивания. До исследования образец крови может храниться при комнатной температуре (23–24 °С) в течение 24 часов в штативе, в вертикальном положении, в удаленном от света месте.

При использовании образца капиллярной крови для клинического анализа необходимо получить свободнотекущие капли капиллярной крови из предварительно прогретой области прокола. Сбор капиллярной крови без сдавливания пальца обеспечивает сохранность клеток. Надавливание области прокола и сбор образца из охлажденной конечности приведут к искажению результатов гемограммы. Образцы капиллярной крови должны быть стабилизированы калиевой солью ЭДТА, поэтому для взятия образца следует использовать капилляры, обработанные K3ЭДТА. Образцы могут храниться при комнатной температуре (23–24 °С) в течение 24 ч в штативе, в вертикальном положении, в удаленном от света месте.

Микроскопия мазка на флору

Лабораторная микроскопия полученного материала осуществляется в течение дня либо за 15 минут в ускоренном режиме. В лаборатории мазки окрашиваются специальными красителями и микроскопируются под различными увеличениями. В гинекологии при исследовании мазка на флору одно стекло окрашивается синим митиленовым, другое — по Грамму, то есть кристаллическим фиолетовым или обесцвечиваются в спирте. Бактерии, окрашенные по Грамму, могут принимать разную окраску в зависимости от положительного или отрицательного характера микробов.

При микроскопии мазков из заднего свода влагалища определяют степень чистоты содержимого. Мазки, полученные из шейки матки и уретры, исследуются на предмет флоры и содержание гонококков.

Степени нормы определяются следующим содержимым: должны присутствовать клетки плоского эпителия из шейки матки и влагалища. Отсутствие клеток говорит о недостатке гормонов эстрогена, избыточном количестве андрогенов или же об атрофическом состоянии эпителиального слоя. Повышенное количество лейкоцитов говорит о воспалительном процессе во влагалище — кольпите. Количество лейкоцитов определяет степень тяжести заболевания.

Наличие некоторого количества золотистого стафилококка говорит о норме флоры. Увеличенное количество говорит о воспалении во влагалище или слизистой оболочке матки.

Что касается содержания микроорганизмов, то в норме допустимо содержание только лактобацилл. Присутствие стрептококков, пневмококков, стафилококков, энтерококков, гонококков, грибков, анаэробов говорит о наличии инфекции в области уретры.

Правила подготовки пациента

У/г забор Стандартные условия: В течение рабочего дня ДЦ. Важно: — За 24 часа (оптимально — 48 часов) исключить половые контакты и использование любых интравагинальных средств, тампонов или спермицидов, спринцевание, проведение гинекологического обследования (кольпоскопия и / или мануальное).

— В течение 2 часов воздерживаться от мочеиспускания. Важно: исследование не требует дополнительного потребления жидкости и наполнение мочевого пузыря.

— Желательно биоматериал сдавать до лечения или не ранее чем через 21 день после окончания курса антибактериальной, антимикотической терапии (если иное не определено вашим врачом). Возможно: Возможны отклонения от стандартных условий по согласованию с врачом. Внимание: Условия подготовки к сдаче урогенитального материала определяются врачом. При особых указаниях врача берется в соответствии с указанной точкой забора. Другой тип БМ Стандартные условия: В течение рабочего дня ДЦ. Внимание: В работу может быть принят для данного метода различный тип биоматериала (это определяет только заказчик, указывая в направлении).

Вы можете добавить данное исследование в корзину на этой странице

Как подготовиться к исследованию и порядок его проведения

Для того чтобы данные, полученные в ходе микроскопического исследования, были верными, необходимо правильно подготовиться к проведению процедуры. Прежде всего следует соблюдать следующие правила:

  • Воздержаться от половой близости в течение двух дней до визита к гинекологу.
  • Отменить использование лубрикантов, свечей для влагалища и спринцевание за пару дней до процедуры.
  • Проводить процедуру нельзя во время менструации.
  • Не стоит принимать ванную за 2 дня до взятия анализа на флору.
  • В день посещения гинеколога не используйте для подмывания наружных половых органов моющие средства, кроме обычного туалетного мыла.
  • Постарайтесь воздержаться от мочеиспускания в течение трех часов до процедуры.

Процедуру проводит врач гинеколог на гинекологическом кресле. Во влагалище вводится специальное зеркальце, а при помощи шпателя или стерильного ватного тампона производится сбор материала для исследования. Как правило, мазок берется из трех мест – цервикального канала шейки матки, отверстия мочеиспускательного канала и слизистой влагалища. Процедура не вызывает неприятных или болезненных ощущений, не требует реабилитации или восстановления.

Мазок крови человека (окр. по Романовскому-Гимза)

Задание для самоподготовки к диагностическому занятию №1

Список учебных препаратов:

Мазок крови человека (окр. по Романовскому-Гимза)

Уметь находить все форменные элементы!

Кровь — своеобразная соединительная ткань (относится к тканям внутренней среды человека) с жидким межклеточный веществом (плазмой), в котором находятся разнообразные клетки (лейкоциты) и постклеточные структуры (эритроциты, тромбоциты).

Происходит из мезенхимы.

Функции крови:

· транспортная — универсальная функция крови, связанная с обеспечением переноса разнообразных веществ.

Включает:

дыхательную ф.- перенос газов в растворенном и химически связанном состоянии

трофическую ф.- перенос питательных веществ из участков их всасывания и накопления к тканям

экскреторную ф.- удаление из тканей продуктов метаболизма и их выделение из организма

регуляторная ф.- перенос гормонов и др. БАВ к клеткам разных тканей, терморегуляторная функция

· гомеостатическая — поддержание постоянства внутренней среды организма

· защитная — нейтрализация чужеродных антигенов, обезвреживание микроорганизмов

В состав плазмы входят: вода, белки (альбумины, глобулины, фибриноген), липиды, низкомолекулярные органические соединения, неорганические ионы.

Форменные элементы:

1. Эритроциты

Морфология: лишены ядер, окрашены эозином в розовый цвет, имеют округлую форму и просветление в центре (двояковогнутый диск).

Функции: дыхательная, регуляторная, защитная.

2. Лейкоциты

Базофилы

Морфология: наличие крупных базофильных гранул фиолетово-вишневого цвета, заполняющих почти всю цитоплазму, ядра дольчатые, трудно различимы за гранулами.

Функции: регуляторная, гомеостатическая ( через накапливаемые или синтезируемые БАВ), защитная.

Эозинофилы

Морфология: ядро состоит из 2 сегментов, в цитоплазме много оксифильных гранул.

Функции: защитная, иммунорегуляторная.

Нейтрофилы

Бывают : сегментоядерные, палочкоядерные, юные.

Морфология: ядро состоит из 3-4связанных сегментов, в цитоплазме трудно различимая мелкая зернистость.

Функции: уничтожение микроорганизмов, разрушение и переваривание поврежденных клеток и тканей, участие в регуляции деятельности других клеток.

Лимфоциты

Морфология: округлое сильно окрашенное ядро, узкий ободок базофильной цитоплазмы без гранул.

Функции: обеспечение реакций иммунитета, регуляция деятельности других клеток.

Моноциты

Морфология: крупное бобовидное или подковообразное светлое ядро, слабобазофильная цитоплазма.

Функции: обеспечение реакций неспецифической защиты, участие в иммунных реакциях, захват и переваривание стареющих и погибших клеток, секреция регуляторных веществ.

3. Тромбоциты

Морфология: безъядерные фрагменты цитоплазмы, имеют небольшой размер.

Функции: остановка кровотечений при повреждении стенки сосудов, гемокоагуляция, участие в реакциях заживления ран, обеспечение нормальной функции сосудов.

2. Мазок красного костного мозга (окр.азур2+эозин).

Уметь находить стадии развития эритроцитов, гранулоцитов, мегакариоциты.

https://www.histol.chuvashia.com/atlas/bon-mar.htm

Рыхлая волокнистая соединительная ткань. Пленочный препарат (окр. железный гематоксилин).

Уметь находить фибробласты и макрофаги.

Плотная оформленная соединительная ткань (сухожилие на продольном срезе) (окр. гематоксилин и эозин).

Уметь находить параллельно идущие пучки коллагеновых волокон, фиброциты и прослойки рыхлой соединительной ткани — эндотеноний (отделяет друг от друга пучки 2 порядка).

Плотная оформленная соединительная ткань (сухожилие на поперечном срезе) (окр. гематоксилин и эозин).

Уметь находить соединительнотканную оболочку снаружи сухожилия — перитеноний, определять сухожильные пучки 1 и 2 порядка.

6. Плотная неоформленная соединительная ткань кожи пальца человека (окр. орсеин+пикрофуксин+гематоксилин).

Пигментная ткань

Задание для самоподготовки к диагностическому занятию №1

Список учебных препаратов:

Мазок крови человека (окр. по Романовскому-Гимза)

Уметь находить все форменные элементы!

Кровь — своеобразная соединительная ткань (относится к тканям внутренней среды человека) с жидким межклеточный веществом (плазмой), в котором находятся разнообразные клетки (лейкоциты) и постклеточные структуры (эритроциты, тромбоциты).

Происходит из мезенхимы.

Функции крови:

· транспортная — универсальная функция крови, связанная с обеспечением переноса разнообразных веществ.

Включает:

дыхательную ф.- перенос газов в растворенном и химически связанном состоянии

трофическую ф.- перенос питательных веществ из участков их всасывания и накопления к тканям

экскреторную ф.- удаление из тканей продуктов метаболизма и их выделение из организма

регуляторная ф.- перенос гормонов и др. БАВ к клеткам разных тканей, терморегуляторная функция

· гомеостатическая — поддержание постоянства внутренней среды организма

· защитная — нейтрализация чужеродных антигенов, обезвреживание микроорганизмов

В состав плазмы входят: вода, белки (альбумины, глобулины, фибриноген), липиды, низкомолекулярные органические соединения, неорганические ионы.

Форменные элементы:

1. Эритроциты

Морфология: лишены ядер, окрашены эозином в розовый цвет, имеют округлую форму и просветление в центре (двояковогнутый диск).

Функции: дыхательная, регуляторная, защитная.

2. Лейкоциты

Базофилы

Морфология: наличие крупных базофильных гранул фиолетово-вишневого цвета, заполняющих почти всю цитоплазму, ядра дольчатые, трудно различимы за гранулами.

Функции: регуляторная, гомеостатическая ( через накапливаемые или синтезируемые БАВ), защитная.

Эозинофилы

Морфология: ядро состоит из 2 сегментов, в цитоплазме много оксифильных гранул.

Функции: защитная, иммунорегуляторная.

Нейтрофилы

Бывают : сегментоядерные, палочкоядерные, юные.

Морфология: ядро состоит из 3-4связанных сегментов, в цитоплазме трудно различимая мелкая зернистость.

Функции: уничтожение микроорганизмов, разрушение и переваривание поврежденных клеток и тканей, участие в регуляции деятельности других клеток.

Лимфоциты

Морфология: округлое сильно окрашенное ядро, узкий ободок базофильной цитоплазмы без гранул.

Функции: обеспечение реакций иммунитета, регуляция деятельности других клеток.

Моноциты

Морфология: крупное бобовидное или подковообразное светлое ядро, слабобазофильная цитоплазма.

Функции: обеспечение реакций неспецифической защиты, участие в иммунных реакциях, захват и переваривание стареющих и погибших клеток, секреция регуляторных веществ.

3. Тромбоциты

Морфология: безъядерные фрагменты цитоплазмы, имеют небольшой размер.

Функции: остановка кровотечений при повреждении стенки сосудов, гемокоагуляция, участие в реакциях заживления ран, обеспечение нормальной функции сосудов.

2. Мазок красного костного мозга (окр.азур2+эозин).

Уметь находить стадии развития эритроцитов, гранулоцитов, мегакариоциты.

https://www.histol.chuvashia.com/atlas/bon-mar.htm

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском гугл на сайте:

Тесты костного мозга

Исследование костного мозга позволяет узнать — производит ли он нормальное количество клеток или нет. При заболевании выявляется гиперплазия (бурный рост) эритроцитарного или других ростков.

Существует два основных вида морфологического исследования костного мозга:

  • аспирация (пунктат),
  • трепанбиопсия.

Во время аспирационной биопсии получают жидкостную взвесь костного мозга. При трепанобиопсии получается больше исследуемого материала. Поэтому последний вариант считается более информативным.

Состав периферической крови

Кровь состоит из морфотических элементов, в просторечии называемых красными клетками крови и плазмы, то есть жидкости, в которой они плавают. Морфология берет свое название именно от морфотических элементов, которые в данном исследовании подвергаются анализу.

Это исследование крови позволяет предварительно оценить состояние нашего здоровья, а в случае обнаружения аномалий – подсказать причину симптомов и сориентировать врача в принятии дальнейших мер в диагностических или лечебных целях.

В состав крови входят эритроциты, белые клетки и тромбоциты. Транспортеры кислорода, то есть эритроциты (красные кровяные тельца), своему цвету обязаны содержащемуся в них гемоглобину – веществу, которое способно связывать и отдавать кислород, транспортируя его по всему организму.

Вторым важным элементом крови являются лейкоциты (белые кровяные тельца). Они служат защите перед бактериями, вирусами, простейшими и т.д. Состоят из нескольких подгрупп – гранулоцитов, лимфоцитов и моноцитов.

Третьей важной группой являются тромбоциты – специализированные клетки, которые способны в нужный момент соединяться и образовывать сгусток, предотвращающий вытекание крови из поврежденного сосуда.

Ниже приводятся объяснения основных комбинаций, указываемых в традиционном результате исследования крови, наряду с нормами для взрослых, отдельно для женщин и для мужчин.

Ярлык Полное название Норма для женщин Норма для мужчин
WBC Количество белых кровяных клеток (лейкоцитов) 4,8-10,8 × 109/л 4,8-10,8 × 109/л
RBC Количество красных кровяных телец (эритроцитов) 4,2-5,4 × 1012/л 4,7-6,1 × 1012/л
HGB Концентрация гемоглобина 12-16 г/дл 14-18 г/дл
MCV Средний объем красных клеток крови 81-99 80-94
PLT Количество тромбоцитов в крови 140-440 × 109/л 140-440 × 109/л

Венозная кровь (такая, на которой проводят морфологическое исследование) обычно берется из вены, расположенной на локтевом сгибе. У маленьких детей может быть использована кровь из пальца. Когда для исследования нужна артериальная кровь (например, в случае газометрии), её берут из бедренной артерии, а иногда из мочки уха.

Микроскопы для анализа крови

Вернуться к списку Задать свой вопрос

Процесс диагностики, основанной на лабораторном исследовании кровяных телец, тесно переплетается с микроскопией: изучением объектов с помощью оптического наблюдательного прибора. Микроскопы для анализа крови подразделяются на монокулярные учебные и бинокулярные медицинские. Первые используются в общеобразовательных целях, помогая ученикам специализированных гимназий или студентам освоить азы микроскопирования и закрепить на практике теоретические материалы. Вторые применяются в поликлиниках, больницах, ветеринарных клиниках и в иной научной деятельности, не связанной с медициной.

В общей сложности при клиническом анализе учитывается до 24 показателей, к примеру, анализируется количество гемоглобина, число эритроцитов, тромбоцитов и лейкоцитов, а также рассчитывается индексы MCV, MCHC и MCH. От точности зависит принятие решения врачом и дальнейшая судьба пациента, это в разы повышает требования к микроскопам для анализа крови: помимо хороших технических характеристик и удобства использования они должны соответствовать нормам ГОСТ и иметь регистрационные удостоверения, в которых указываются место производства изделия, степень потенциального риска, а также присваивается определенный код общероссийского классификатора. В этом случае они допускаются к эксплуатации по целевому назначению на территории РФ приказом Росздравнадзора. А биологические модели, которые планируется использовать не в медицине, а дома или в классах биологии при обучении будущих медиков, таковой регистрации не требуют.

Функциональность микроскопов призвана обеспечивать высокий уровень проводимых на них работ, диапазон полезных увеличений находится в пределах 40-1600 крат (в редких исключениях 2000x). Целесообразна поддержка сразу нескольких методов наблюдения микропрепаратов (мазков, раздавленной капли и др.). Основной методикой является способ контрастирования в проходящем освещении в светлом поле. Для этого обязательно присутствие нижней подсветки, которая бывает: светодиодной или ламповой. Другой важный модуль: наличие встроенного конденсора Аббе — он контролирует толщину пучка света, попадающей на препарат, и позволяет добиться резкости на предельных увеличениях, максимально снижая негативное влияние эффекта рассеяния. Качественное изображение обеспечат широкопольные окуляры и план-ахроматические объективы, которые минимизируют проявление хроматических и сферических аберраций. Предметный столик обладает примерными размерами 145×175 и оснащается препаратоводителем, чтобы и избежать случайной порчи образца или загрязнение поверхности стекол во время неосторожного касания лаборанта. Винт точной фокусировки (микровинт с шагом не менее 0,002 мм) создаст благоприятные условия для быстрого фокусирования и получения чистой контрастной картинки. Широкое применение также находят поляризационные и люминесцентные микроскопы, получающиеся, впрочем, из обычных световых: благодаря модульной конструкции к ним можно присоединить источник люминесценции или специальные фильтры – поляризатор и анализатор (для просмотра неоднородных молекулярных соединений). Такая техника маркируется приставками «ЛЮМ» или «ПОЛЯР».

Производители, положительно зарекомендовавшие себя в России и имеющие в комплектации всю оформленную надлежащим образом документацию: Микромед, Биомед, ЛОМО. Их достоинства: модельный ряд, удовлетворяющий описанным выше параметрам, надежность и долговечность, большой срок износа, высококачественная оптика. Насадки системы визуализации производятся двух типов: бинокуляр и тринокуляр. Последний реализует интеграцию с компьютером путем подключения в третий окулярный тубус цифровой камеры для последующей регистрирования картины микропрепарата крови в виде электронных файлов (фотографии в формате jpeg).

Ссылка на основную публикацию
Похожие публикации
Общество с ограниченной ответственностью
«Клиника высокотехнологичной медицины»
Адрес: 140009, РФ, Московская область, город Люберцы, улица Митрофанова, дом 11А
Тел. 8(495)565-48-08; 8(495)558-54-29;
ИНН 5027250575 КПП 502701001 ОГРН 1175027007033